提到斐林试剂大家都生疏,非常是针对学员而言,斐林试剂在平常一般 是被用于评定可溶的还原糖的,许多人到平常非常容易将斐林试剂和班氏试剂搞混起來,误以为二者是一样的,实际上二者的差别是非常大的,尤其是应用的方式及其基本原理全是有差别的,假如将斐林试剂和葡萄糖应沉淀色调是啥?
斐林试剂与葡萄糖反映沉淀色调是啥?
斐林试剂与单糖中的还原性糖(即醛糖)反映转化成砖红色沉淀。
配置方式
配置方式:0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配置方式是将50 g氢氧化钠溶液和137 g酒石酸钾钠溶解500 mI纯净水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配置方式是将34.5 g结晶体硫代硫酸钠溶解500 ml水里,加0.5 mI盐酸。混和匀称。
斐林试剂的操作方法:一般将斐林试剂甲液和乙液等容积混和(或在2 mL甲液中滴4~5滴乙液),再将混和后的斐林试剂倒进待测液,水浴加热或立即加温(普通高中人教版生物必修一中为60℃水浴加热)。如待测液中存有还原糖,则展现砖红色沉淀;如待测液中不会有还原糖,则依然呈深蓝色。
还原糖试验
1:向试管婴儿内引入2ml被测组织样液。
2:向试管婴儿内引入1ml斐林试剂(甲乙液混和匀称,甲水率较多,乙液只需小量。随后再引入)。
3:将试管婴儿放进盛满50~65℃温开水的大量杯中加温约2min。
4:观查试管婴儿中出現的色调转变。
(应是淡蓝色-----深棕色——砖红色(沉定))
核糖、[麦芽糖浆、葡萄糖、葡萄糖](还原性糖)均为砖红色沉淀;绵白糖、木薯淀粉无转变(由于绵白糖、木薯淀粉为非还原性糖)。
斐林试剂是新配置的水溶液,它在加温标准下与醛基反映,被转变成砖红色的沉定,可用以评定可溶还原糖的存有。用斐林试剂评定可溶还原糖时,水溶液的色调转变全过程为:淡蓝色中央深棕色中央砖红色(沉定)。
评定微生物组织中是不是带有蛋白时,常见双缩脲法,应用的是双缩脲试剂,产生的是双缩脲反应。具备2个或2个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂造成蓝紫色反映。蛋白的肽键在碱性溶液里能与Cu2 络生成暗紫色的化合物。色调浓淡与蛋白浓度值正比。